有效补救RNase污染问题，使RNA完好无缺！

作者：IVD参考资料

RNase污染物无处不在

RNase（Ribonuclease，真核细胞膜酶）是一类能够催化RNA降解为小分子RNA的核酸酶，尤其存在于真核、线粒体生物的所有细胞膜和一个组织中的，通常有极强活性，RNA检验中的微量的RNase污染物没法引发其完全降解。实验者室中的RNase污染物的主要举例来说有：

外源性水污染物

1）实验者中的使用的水溶液、催化体系的各组分还原剂、枪头等在内的实验者耗材；

2）实验者大生态的污染物，RNase 存在于氮气、坑洞和大多数物体很薄；

3）实验者人员的皮肤上或唾液等。

内源性水污染物

所有一个组织容器均内含内源性RNase。

如何从根源上不必要RNase污染物

RNase的无处不在，使得实验者处理过程中的，较难保存RNA检验的基本性，引发实验者败北或影响RNA深入研究的结果。因此，从根源上不必要RNase污染物十分必要，一方面要严格控制外源性RNase的污染物，另一方面要最大限度地抑制内源性的RNase。

控制外源性RNase污染物的方法：

1. 操作人员卫兵

在实验者处理过程中的戴靴子可不必要来源于短时间内的RNase污染物；触摸皮肤上、门把手及普通物体很薄后换用靴子；

2. 使用专业仪器与还原剂

RNA操作专供的移液枪；使用RNase-free的枪头和离心管；使用RNase-free的化合物与还原剂；

3. 并不需要实验者操作生态

远离/遮蔽通风孔或开放车站内，走动较少的地区作为RNase-free地区；

4. 其他留意的点

在RNA提炼出和深入研究此后，不要进行时其他可能引起RNase 污染物的实验者。

抑制内源性RNase活性的方法

1. 检验保存

一个组织时域后若不直接提炼出RNA，要及时用冷凝快速冷冻存于-80°C生态，并尽早进行时实验者，这样可使RNA的降解达到最少。

2. 添加酶抑制剂

在细胞膜裂解液中的转入RNase 酶抑制剂（RNase inhibitor），使破碎细胞膜与灭活RNase 同步进行时，最大限度地减少细胞膜破碎处理过程中的所释放的RNase的活性。

RNase酶抑制剂可适当不必要RNase污染物

RNase酶抑制剂（RNase inhibitor，简称RNasin）是存在于人的消化道中的的一种特异性RNase酶抑制剂，能够特异地与RNase以非碳原子混合形成复合体，造成RNase失活，从而保护RNA的基本度。目前，RNasin主要用于cDNA合成，胃转录，胃翻译，以及mRNA-protein复合物分离纯化等处理过程中的保护RNA不被降解，还可用于特定RNase活性的断定等。

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